La gélose pomme de terre-dextrose (PDA) est un bon milieu semi-solide à usage général utilisé pour la culture de champignons. Il est souvent utilisé pour isoler, cultiver et entretenir des espèces formant des champignons. Vous pouvez acheter des boîtes de Petri prêtes à l'emploi ou des tubes à essai contenant un PDA, ou préparer rapidement un PDA à l'aide d'un prémélange commercial. Cependant, il n’est pas difficile de créer une version simple et efficace à partir de zéro à peu de frais.
crédit: Zedcor à 100% / PhotoObjects.net / Getty ImagesPréparation de l'extrait de pomme de terre
Étape 1
Placez les pommes de terre dans une casserole avec environ 1,2 litre d'eau du robinet et laissez bouillir sur une cuisinière pendant 1 heure.
Étape 2
Retirer la casserole du feu et laisser le liquide refroidir jusqu'à ce qu'il puisse être manipulé confortablement (environ 10 minutes).
Étape 3
Versez l'extrait liquide de pomme de terre dans une passoire ou une étamine et ramassez-le dans un autre récipient.
Préparer le médium
Étape 1
Ajouter le dextrose et la gélose à 1 litre d’eau d’extrait de pomme de terre.
Étape 2
Testez le pH de la solution avec du papier de test du pH ou un pH-mètre.
Étape 3
Si le pH est supérieur à 6,5, ajustez-le en ajoutant une goutte de solution d'acide chlorhydrique à la fois et en effectuant un nouveau test.
Étape 4
Si le pH est inférieur à 6, ajustez-le en ajoutant une goutte de solution de soude à la fois et en effectuant un nouveau test.
Stérilisation
Étape 1
Bien mélanger le milieu et le diviser en petits lots de 250 ml versés dans les quatre fioles de 500 ml (Remarque: chaque fiole ne doit pas être remplie à plus de la moitié pour éviter tout débordement).
Étape 2
Couvrir chaque flacon avec un morceau de papier d'aluminium faiblement serti, de sorte que le papier ne tombe pas, mais ne fait pas un joint étanche.
Étape 3
Placez les flacons dans un autocuiseur.
Étape 4
Faites fonctionner l’autocuiseur conformément aux instructions du fabricant pour stériliser le PDA à 121 ° C (250 ° F) à une pression de 103 421 Pascals (15 PSI) pendant 15 minutes.
Étape 5
Éteignez l'autocuiseur et laissez-le revenir à la pression atmosphérique, puis retirez les flacons et laissez-les refroidir jusqu'à ce qu'ils puissent être manipulés.
Verser le médium
Étape 1
Alignez les boîtes de Pétri stériles sur une surface plane.
Étape 2
Une fois que les flacons ont refroidi à la température de manipulation, mais avant que le milieu ne commence à se solidifier, saisissez un flacon avec une main, retirez-le et mettez de côté son couvercle en aluminium avec l'autre main.
Étape 3
Pour chaque boîte de Pétri, soulevez le couvercle avec une main, remplissez-le rapidement à moitié avec du PDA liquide et replacez le couvercle.
Étape 4
Répétez l'étape 3 ci-dessus jusqu'à ce que tous les plats de Pétri soient remplis.
Étape 5
S'il reste des PDA, récupérez sans serrer le ballon avec son couvercle en aluminium d'origine, laissez-le refroidir et se solidifier, resserrez le couvercle en aluminium et conservez-le au réfrigérateur.
